TB Broth – médium doporučené pro expresi proteinů v E. coli

TB Broth je suché, práškové kultivační médium v lahvích po 250 g, speciálně navržené pro vysoce účinnou expresi proteinů v kmenech Escherichia coli. Díky optimalizovanému složení TB médium výrazně zvyšuje výtěžky proteinů ve srovnání se standardními bujóny a zároveň zajišťuje stabilní podmínky pro růst buněk. Médium je doporučeno pro různé metody indukce exprese, včetně použití IPTG, arabinózy nebo maltózy, a nachází uplatnění při resuscitaci a uchovávání lyofilizovaných bakteriálních kmenů používaných v molekulární biologii.

Složení TB Broth a příprava média

Složení TB Broth je založeno na bohaté směsi živin: na 1 litr hotového média připadá 12,0 g tryptonu, 24,0 g kvasničného extraktu, 2,3 g dihydrogenfosforečnanu draselného (KH₂PO₄) a 12,5 g hydrogenfosforečnanu draselného (K₂HPO₄), s konečným pH 7,2 ± 0,2 při 25°C. Pro přípravu 1 L média je třeba navážit 50,9 g prášku, rozpustit jej v destilované vodě za zahřívání, poté přidat 4 mL glycerolu, rozlít médium do vhodných nádob a sterilizovat v autoklávu při teplotě 121°C po dobu 15 minut. Takto připravené TB Broth poskytuje buňkám vysokou dostupnost zdrojů uhlíku, dusíku, vitaminů a fosfátových pufrů, což se projevuje rychlým růstem a vysokou optickou hustotou bakteriálních kultur.

Účinnost, kontrola kvality a podmínky skladování

TB Broth bylo validováno v porovnávacích testech s TB médii připravenými ze surovin jiných značek (Brand O a Brand S) za stejných kultivačních podmínek kmene E. coli DH5α s plazmidem pUC19; médium Biologix poskytlo vyšší průměrné výtěžky nukleové kyseliny při zachování velmi dobrých poměrů A260/280 a A260/230, což potvrzuje jeho vhodnost pro náročné aplikace spojené s expresí proteinů a prací s plazmidy. Přípravek by měl být skladován při teplotě 2–30°C v původním, těsně uzavřeném obalu; po každém použití se doporučuje okamžitě utáhnout víčko, aby byl prášek chráněn před vlhkostí. Doba použitelnosti TB Broth je 36 měsíců od data výroby, což umožňuje bezpečné plánování dlouhodobých sérií experimentů ve výzkumných a výrobních laboratořích.